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生化培養箱在多管發酵法的應用
一、兩種方法的基本原理
1、生化培養箱的多管發酵法
生化培養箱初發酵的實驗:生化培養箱的發酵管內裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培養液,并在內倒置有小的玻璃管。每個樣品都使用三個不同的水樣量接種,相同的接種水樣量要有五管,將水樣分別接種到裝有乳糖蛋白胨培養液的發酵管中,在37℃±0.5℃下培養24h±2h。
乳糖能起到選擇的作用,因為許多**都不能發酵乳糖,而大腸菌群能夠發酵乳糖并且產酸產氣。培養液中加入溴甲酚紫作為酸度指示劑,**產酸后,培養液即由原來的紫色變成黃色。產酸產氣的發酵管表明試驗陽性,如在倒管內產氣不明顯,可輕拍發酵管,有小氣泡升起為陽性。
生化培養箱復發酵的實驗 輕微振蕩初發酵試驗陽性結果的發酵管,用3mm接種環將培養物(2-3環)轉接到EC培養液中,在44.5℃±0.5℃下培養24h±2h(提高培養溫度可造成不利于來自自然環境的大腸菌群的生長)。培養后立即觀察,發酵管產氣則證實為糞大腸菌群陽性。
2、生化培養箱的濾膜法
濾膜是一種微孔性濾膜,孔徑0.45μm。將水樣注入已**的放有濾膜的過濾器中,經過抽濾,**即被截留在膜上,然后將濾膜貼于M-FC培養基上,在44.5℃±0.5℃下培養24 h±2h。糞大腸菌群菌落在M-FC培養基上呈藍色或藍綠色,其他非糞大腸菌群菌落成灰色、淡黃色或無色。正常情況下,由于溫度和玫瑰酸鹽試劑的選擇性作用,在M-FC培養基上很少見到非糞大腸菌菌落。
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